紅花繼木的組織培養包括初代培養、繼代增殖培養和生根培養。組培技術在紅花繼木生產上的應用,不僅僅限于組培育苗,還有望通過組培在育種上的應用,解決種間、屬間等遠緣雜交和雜種胚停止發育的缺陷,使紅花繼木的種質資源進一步純化和提高。
1、外植體的選擇
選生長健壯、無病蟲害的紅花繼木莖尖、芽及枝等作外植體,其中外植體采集在 7~8 月最好,污染率較低。
2、培養基的配制
初代培養和繼代增殖培養基可參考 MS+BA1.0mg/l+IBA1.0mg/l;
生根培養基可參考 1/2MS+NAA1.0~1.5mg/l+0.1%的活性炭。
3、培養條件
紅花繼木的培養條件一般為:溫度 20℃ 左右,光照時間 14h/d,光照強度為 1500LX。
4、操作步驟
(1)外植體消毒:材料采回后,及時用稀薄的漂白粉溶液洗去材料上的污物,而后用自來水反復沖洗 20 分鐘,直至沖洗干凈備用。
(2)接種:將消毒好的外植體在無菌條件下用 70%酒精浸泡 30s,再用 0.1%升汞在浸泡消毒 10 分鐘,無菌水沖洗 3~4 次。然后用消毒的鑷子夾取材料置于培養基上進行無菌培養。注意接種時所用的鑷子需先在 70%的酒精中消毒,并在酒精燈上燒一下再用,以求更好消毒,避免接種外植體感染。
當芽長至 2 厘米左右時,切取芽端接種在增殖培養基上分化增殖,然后將繼代增殖的叢生芽分別移至生根培養基中誘導生根,當根長至 1~2 厘米長時從培養室中取出煉苗,以備移栽。
5、紅花繼木組培苗的優勢
(1)繁殖速度快:從優良母株上取下一個芽或一部分組織,理想條件下一年能繁殖幾萬到十幾萬株新的個體
(2)組培苗性狀一致:用組培技術繁殖的植株來自于一個親本主體,所以能夠保持后代植株具有高度的一致性和整齊度。
(3)不受親本限制:由于組培苗是采用無性繁殖技術培育植株,所以不受親本不開花、不結籽及雜交品種后代易變異等品種特性的影響,可繁殖不育、雜交品種及易變異品種。
(4)不受季節限制:組培生產采用人工光照,室內培養,可以周年生產。
(5)節省土地和資源:由于組培生產可以在室內集中生產,立體分層生產,集中管理,能夠最大限度地節省土地、人力等,符合現代農業的發展方向。
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