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    組培污染率高怎么辦?木木教你如何降低植物組培的污染率

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    如何降低植物組培的污染率

    在組培技術日趨成熟的今天,越來越多的公司、企業甚至個人選擇利用組培技術進行生產化育苗,但在組織培養中通常會出現不同程度的污染。污染不僅會對植株造成傷害,增加接種源及污染的機率,而且會造成很大的經濟損失。因此,在市場競爭中,如何降低組織培養的污染率是工廠化生產不可忽視的技術環節。

    首先,讓我們來了解一下污染的來源。植物組織培養污染主要是由霉菌、細菌和酵母菌引起的污染。霉菌和酵母菌在培養條件下生長快,容易觀察到,而細菌潛伏期長,植物組織一般不表現癥狀,所以很難在前期用肉眼觀察到。細菌污染的來源主要有:材料內部滅菌處理不好、內生菌的存在、寄生植物的污染。有些植物的昆蟲和螨蟲的體表帶有霉菌的孢子和細菌,在九、十月份是重要的污染源,因多種植物昆蟲處在大量繁殖階段,此時大量昆蟲造成的污染源最易造成組培污染的嚴重發生。另外,隨著植物材料年齡的增長,植物材料的健康狀況不斷惡化,組培污染也更加嚴重;其次環境條件和操作過程也是引起污染的主要原因。

    木木組培根據多年的從業經驗,針對“如何有效降低植物組織培養的污染率”為題,與組培好友共同分享與探討。


    01

    整個組培室的規劃設計要合理。

    有菌區和無菌區要進行嚴格的區域劃分隔離,減少非必要的進出通道,控制污染源;如果培養室面積過大,要分割成若干面積較小的獨立的培養室,這樣一旦發生污染,可以形成有效的控制范圍,減少損失;在接種室和培養室要設置一定面積的緩沖間,并且原則上緩沖間的門和功能室的門盡量避免在同一個方向。


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    02

    配備一定數量的滅菌設備并定期檢查。

    按生產環節來說,配置培養基的水要保證是無菌的蒸餾水;進行培養基滅菌時要保證滅菌溫度和壓力,尤其注意當滅菌鍋達到規定的溫度和壓力之后要保證滅菌時間;接種室的超凈工作臺的初效過濾網要及時清洗,要定期檢查超凈工作臺的高效過濾器的濾膜是否需要更換,接種過程中要對接種工具進行消毒避免交叉感染;接種室和培養室都要配備一定的滅菌設備定期進行室內環境的整體消毒殺菌,最大限度確保無菌區的潔凈程度符合生產要求。


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    03

    制定科學合理的組培室無菌操作規程。

    在無菌操作過程中,工作人員嚴格按照無菌操作的要求,規范熟練地完成好每一個步驟,能有效地減少由操作引起的污染。具體要求如下:

    一、接種前,工作人員的雙手必須用肥皂水洗凈,進入接種室后換上工作服、戴上口罩,用75%的酒精擦拭消毒雙手;

    二、用75%的酒精擦拭超凈工作臺,接種工具(如剪刀、手術刀、鑷子等)使用前要在75%酒精中浸泡,再在火焰上灼燒,冷卻后使用;

    三、在超凈工作臺上正確擺放接種用具、培養材料和培養基,臺面上的東西不能堆放太多,以免影響氣流;

    四、接種過程中應避免他人來回走動,操作人員禁止談話,并盡量避免操作人員頭部伸入超凈工作臺的工作區內;

    五、培養瓶的開啟、接種材料的切割、分裝、封口等步驟要規范熟練,避免交叉污染;

    六、每切割、轉接完一瓶母種材料后,要及時更換無菌紙,重新更換所用的接種工具,最好備兩套交替使用。


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    04

    其他注意事項:

    一、配備相應的化學試劑進行必要處理。在生產過程中,如有必要,可在培養基中加入適量的抑菌劑以控制污染。

    二、在繼代培養時一定要仔細檢查,避免對污染的材料進行擴大增殖。

    三、定時對培養基進行觀察,出現污染狀況要進行及時清理。


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    組培室設備

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